O chá é uma das três principais bebidas do mundo, rica em polifenóis, com atividades antioxidantes, anticancerígenas, antivírus, hipoglicemiantes, hipolipidêmicas e outras atividades biológicas e funções de saúde. O chá pode ser dividido em chá não fermentado, chá fermentado e chá pós-fermentado de acordo com sua tecnologia de processamento e grau de fermentação. Chá pós-fermentado refere-se ao chá com participação microbiana na fermentação, como chá cozido Pu 'er, chá Fu Brick, chá Liubao produzido na China e Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin e Kuroyamecha produzidos no Japão. Esses chás fermentados microbianos são apreciados pelas pessoas por seus efeitos na saúde, como redução da gordura no sangue, açúcar no sangue e colesterol.

Após a fermentação microbiana, os polifenóis do chá são transformados por enzimas e muitos polifenóis com novas estruturas são formados. Teadenol A e Teadenol B são derivados de polifenóis isolados de chá fermentado com Aspergillus sp (PK-1, FARM AP-21280). Num estudo subsequente, foi detectado em grandes quantidades de chá fermentado. Os teadenóis têm dois estereoisômeros, cis-Teadenol A e trans-Teadenol B. Fórmula molecular C14H12O6, peso molecular 276,06, [MH] -275,0562, fórmula estrutural é mostrada na Figura 1. Os teadenóis têm grupos cíclicos semelhantes ao anel a e C- estruturas em anel de 3-álcoois flavanos e são derivados de catequinas de fissão de anel B. Teadenol A e Teadenol B podem ser biossintetizados a partir de EGCG e GCG, respectivamente.

Em estudos subsequentes, constatou-se que os Teadenóis apresentavam atividades biológicas como promoção da secreção de adiponectina, inibição da expressão da proteína tirosina fosfatase 1B (PTP1B) e clareamento, o que atraiu a atenção de diversos pesquisadores. A adiponectina é um polipeptídeo altamente específico para o tecido adiposo, que pode reduzir significativamente a incidência de distúrbios metabólicos no diabetes tipo II. A PTP1B é atualmente reconhecida como um alvo terapêutico para diabetes e obesidade, indicando que os teadenóis têm potenciais efeitos hipoglicêmicos e de perda de peso.

Neste artigo, foram revisadas a detecção do conteúdo, biossíntese, síntese total e bioatividade de Teadenóis em chá fermentado microbiano, a fim de fornecer base científica e referência teórica para o desenvolvimento e utilização de Teadenóis.

▲ TA imagem física

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Detecção de teadenóis em chá fermentado microbiano

Depois que os teadenóis foram obtidos do chá fermentado de Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) pela primeira vez, técnicas de HPLC e LC-MS/MS foram usadas para estudar os teadenóis em vários tipos de chá. Estudos demonstraram que os Teadenóis existem principalmente no chá fermentado microbiano.

▲ TA, cromatograma líquido TB

▲ Espectrometria de massa de chá fermentado microbiano e TA e TB

Aspergillus oryzae SP.PK-1, FARM AP-21280, Aspergillus oryzae sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus awamori sp.SK-1, Aspergillus oryzae Sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus oryzae sp.SK-1 , NBRS 4122), Eurotium sp. Ka-1, FARM AP-21291, Diferentes concentrações de Teadenóis foram detectadas no chá fermentado Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin e Kuroyamecha, gentoku-cha vendido no Japão, e no chá cozido de Pu erh, chá Liubao e Fu Brick chá da China.

O conteúdo de teadenóis em diferentes chás é diferente, o que se especula ser causado pelas diferentes condições de processamento e fermentação.

Outros estudos mostraram que o teor de Teadenóis em folhas de chá sem processamento de fermentação microbiana, como chá verde, chá preto, chá oolong e chá branco, era extremamente baixo, basicamente abaixo do limite de detecção. O conteúdo de teadenol em várias folhas de chá é mostrado na Tabela 1.

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Bioatividade de Teadenóis

Estudos demonstraram que os teadenóis podem promover a perda de peso, combater o diabetes, combater a oxidação, inibir a proliferação de células cancerígenas e clarear a pele.

Teadenol A pode promover a secreção de adiponectina. A adiponectina é um peptídeo endógeno secretado pelos adipócitos e altamente específico para o tecido adiposo. Está altamente correlacionado negativamente com o tecido adiposo visceral e possui propriedades antiinflamatórias e antiateroscleróticas. Portanto, Teadenol A tem potencial para perder peso.

Teadenol A também inibe a expressão da proteína tirosina fosfatase 1B (PTP1B), uma tirosina fosfatase não receptora clássica na família da proteína tirosina fosfatase, que desempenha um papel negativo importante na sinalização da insulina e é atualmente reconhecida como um alvo terapêutico para diabetes. Teadenol A pode regular positivamente a insulina inibindo a expressão de PTP1B. Enquanto isso, TOMOTAKA et al. mostraram que o Teadenol A é um ligante do receptor de ácidos graxos de cadeia longa GPR120, que pode ligar e ativar diretamente o GPR120 e promover a secreção do hormônio insulina GLP-1 nas células endócrinas intestinais STC-1. O Glp-1 inibe o apetite e aumenta a secreção de insulina, apresentando efeitos antidiabéticos. Portanto, Teadenol A tem um potencial efeito antidiabético.

Os valores de IC50 da atividade de eliminação do DPPH e da atividade de eliminação do radical ânion superóxido do Teadenol A foram 64,8 μg/mL e 3,335 mg/mL, respectivamente. Os valores de IC50 da capacidade antioxidante total e capacidade de fornecimento de hidrogênio foram 17,6 U/mL e 12 U/mL, respectivamente. Também foi demonstrado que o extrato de chá contendo Teadenol B tem alta atividade antiproliferativa contra células de câncer de cólon HT-29 e inibe as células de câncer de cólon HT-29, aumentando os níveis de expressão de caspase-3/7, caspase-8 e Caspase. -9, morte de receptores e vias de apoptose mitocondrial.

Além disso, os teadenóis são uma classe de polifenóis que podem clarear a pele ao inibir a atividade dos melanócitos e a síntese de melanina.

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A síntese de Teadenóis

Como pode ser visto nos dados da pesquisa na Tabela 1, os teadenóis no chá de fermentação microbiana têm baixo teor e alto custo de enriquecimento e purificação, o que é difícil de atender às necessidades de pesquisa aprofundada e desenvolvimento de aplicações. Portanto, estudiosos têm realizado estudos sobre a síntese de tais substâncias a partir de duas direções de biotransformação e síntese química.

WULANDARI et al. inocularam Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) na solução mista de EGCG e GCG esterilizados. Após 2 semanas de cultura a 25 ℃, utilizou-se HPLC para analisar a composição do meio de cultura. Teadenol A e Teadenol B foram detectados. Posteriormente, Aspergillus oryzae A. Awamori (NRIB-2061) e Aspergillus oryzae A. Kawachii (IFO-4308) foram inoculados em uma mistura de EGCG e GCG em autoclave, respectivamente, usando o mesmo método. Teadenol A e Teadenol B foram detectados em ambos os meios. Estes estudos demonstraram que a transformação microbiana de EGCG e GCG pode produzir Teadenol A e Teadenol B. SONG et al. utilizaram EGCG como matéria-prima e inocularam Aspergillus sp para estudar as condições ótimas para produção de Teadenol A e Teadenol B por cultura líquida e sólida. Os resultados mostraram que o meio CZapEK-DOX modificado contendo 5% de EGCG e 1% de chá verde em pó apresentou o maior rendimento. Verificou-se que a adição de chá verde em pó não afetou diretamente a produção de Teadenol A e Teadenol B, mas induziu principalmente um aumento na quantidade de biosintase envolvida. Além disso, YOSHIDA et al. sintetizou Teadenol A e Teadenol B a partir do floroglucinol. As principais etapas da síntese foram a reação catalítica α-aminoxi assimétrica de aldeídos catalíticos orgânicos e a substituição alil intramolecular de fenol catalisado por paládio.

▲ Microscopia eletrônica do processo de fermentação do chá

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Estudo de aplicação de Teadenóis

Devido à sua significativa atividade biológica, os Teadenóis têm sido utilizados em produtos farmacêuticos, alimentos e rações, cosméticos, reagentes de detecção e outros campos.

Existem produtos relacionados que contêm teadenóis na área alimentícia, como o chá japonês para emagrecer e os polifenóis do chá fermentado. Além disso, Yanagida et al. confirmou que extratos de chá contendo Teadenol A e Teadenol B poderiam ser aplicados no processamento de alimentos, condimentos, suplementos de saúde, rações para animais e cosméticos. ITO et al. preparou um agente tópico para a pele contendo Teadenóis com forte efeito clareador, inibição de radicais livres e efeito antirrugas. Também tem os efeitos de tratar a acne, hidratar, melhorar a função de barreira, inibir a inflamação derivada de UV e úlceras de pressão.

Na China, os Teadenóis são chamados de chá fu. Os pesquisadores conduziram muitos estudos sobre extratos de chá ou fórmulas compostas contendo chá Fu A e chá Fu B em termos de redução de lipídios no sangue, perda de peso, açúcar no sangue, hipertensão e amolecimento dos vasos sanguíneos. O chá fu A de alta pureza, purificado e preparado por Zhao Ming et al. pode ser usado para preparação de medicamentos antilipídicos. He Zhihong et al. fez cápsulas de chá, comprimidos ou grânulos contendo chá escuro anhua de Fu A e Fu B, gynostema pentaphylla, Rhizoma orientalis, ofiopogon e outros produtos medicinais e de homologia alimentar, que têm efeitos óbvios e duradouros na perda de peso e redução de lipídios para todos os tipos de obesos pessoas. Tan Xiao 'ao preparou o chá fuzhuan com fuzhuan A e Fuzhuan B, que é fácil de ser absorvido pelo corpo humano e tem efeitos óbvios na redução da hiperlipidemia, hiperglicemia, hipertensão e amolecimento dos vasos sanguíneos.

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"Linguagem

Os teadenóis são derivados de catequinas de fissão do anel B existentes no chá fermentado microbiano, que podem ser obtidos a partir da transformação microbiana do galato de epigalocatequina ou da síntese total do floroglucinol. Estudos demonstraram que os teadenóis estão contidos em vários chás fermentados microbianos. Os produtos incluem chá fermentado de Aspergillus Niger, chá fermentado de Aspergillus oryzae, chá fermentado de Aspergillus oryzae, chá fermentado de Sachinella, Kippukucha (Japão), Saryusoso (Japão), Yamabukinadeshiko (Japão), Suraribijin (Japão), Kuroyamecha (Japão), Gentok U- cha (Japão), Awa-Bancha (Japão), Goishi-cha (Japão), chá Pu 'er, chá Liubao e chá Fu Brick, mas o conteúdo de Teadenóis em vários chás é significativamente diferente. O teor de Teadenol A e B variou de 0,01% a 6,98% e 0,01% a 0,54%, respectivamente. Ao mesmo tempo, os chás oolong, branco, verde e preto não contêm esses compostos.

No que diz respeito às pesquisas atuais, os estudos sobre Teadenóis ainda são limitados, envolvendo apenas a fonte, conteúdo, biossíntese e via sintética total, e seu mecanismo de ação e desenvolvimento e aplicação ainda necessitam de muitas pesquisas. Com mais pesquisas, os compostos de Teadenols terão maior valor de desenvolvimento e amplas perspectivas de aplicação.