Il tè è una delle tre principali bevande al mondo, ricca di polifenoli, con attività antiossidanti, antitumorali, antivirus, ipoglicemizzanti, ipolipemizzanti e altre attività biologiche e funzioni sanitarie. Il tè può essere suddiviso in tè non fermentato, tè fermentato e tè post-fermentato in base alla tecnologia di lavorazione e al grado di fermentazione. Il tè post-fermentato si riferisce al tè con partecipazione microbica nella fermentazione, come il tè cotto Pu 'er, il tè Fu Brick, il tè Liubao prodotto in Cina e Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin e Kuroyamecha prodotti in Giappone. Questi tè fermentati microbici sono amati dalle persone per i loro effetti sanitari come la riduzione dei grassi nel sangue, dello zucchero nel sangue e del colesterolo.

Dopo la fermentazione microbica, i polifenoli del tè vengono trasformati dagli enzimi e si formano molti polifenoli con nuove strutture. Teadenol A e Teadenol B sono derivati ​​polifenolici isolati dal tè fermentato con Aspergillus sp (PK-1, FARM AP-21280). In uno studio successivo è stata rilevata in grandi quantità di tè fermentato. I teadenoli hanno due stereoisomeri, cis-Teadenolo A e trans-Teadenolo B. Formula molecolare C14H12O6, peso molecolare 276,06, [MH]-275,0562, la formula strutturale è mostrata nella Figura 1. I teadenoli hanno gruppi ciclici simili all'anello a e al C- strutture ad anello dei flavani 3-alcoli e sono derivati ​​delle catechine di fissione dell'anello B. Teadenol A e Teadenol B possono essere biosintetizzati rispettivamente da EGCG e GCG.

In studi successivi, si è scoperto che i teadenoli avevano attività biologiche come la promozione della secrezione di adiponectina, l'inibizione dell'espressione della proteina tirosina fosfatasi 1B (PTP1B) e lo sbiancamento, che hanno attirato l'attenzione di molti ricercatori. L'adiponectina è un polipeptide altamente specifico per il tessuto adiposo, che può ridurre significativamente l'incidenza dei disturbi metabolici nel diabete di tipo II. PTP1B è attualmente riconosciuto come bersaglio terapeutico per il diabete e l’obesità, indicando che Teadenols ha potenziali effetti ipoglicemici e di perdita di peso.

In questo articolo sono stati esaminati il ​​rilevamento del contenuto, la biosintesi, la sintesi totale e la bioattività dei teadenoli nel tè fermentato microbico, al fine di fornire basi scientifiche e riferimenti teorici per lo sviluppo e l'utilizzo dei teadenoli.

▲ Immagine fisica TA

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Rilevazione di teadenoli nel tè fermentato microbico

Dopo che i teadenoli sono stati ottenuti dal tè fermentato Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) per la prima volta, sono state utilizzate tecniche HPLC e LC-MS/MS per studiare i teadenoli in vari tipi di tè. Gli studi hanno dimostrato che i teadenoli sono presenti principalmente nel tè fermentato microbico.

▲ Cromatogramma liquido TA, TB

▲ Spettrometria di massa di tè fermentato microbico e TA e TB

Aspergillus oryzae SP.PK-1, FARM AP-21280, Aspergillus oryzae sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus awamori sp.SK-1, Aspergillus oryzae Sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus oryzae sp.SK-1 , NBRS 4122), Eurotium sp. Ka-1, FARM AP-21291, Diverse concentrazioni di Teadenols sono state rilevate nel tè fermentato Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin e Kuroyamecha, gentoku-cha venduto in Giappone, e nel tè cotto di Pu erh, tè Liubao e Fu Brick tè della Cina.

Il contenuto di Teadenol nei diversi tè è diverso, il che si ipotizza sia causato dalle diverse condizioni di lavorazione e di fermentazione.

Ulteriori studi hanno dimostrato che il contenuto di teadenoli nelle foglie di tè senza processo di fermentazione microbica, come tè verde, tè nero, tè oolong e tè bianco, era estremamente basso, sostanzialmente al di sotto del limite di rilevamento. Il contenuto di teadenolo nelle varie foglie di tè è mostrato nella Tabella 1.

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Bioattività dei teadenoli

Gli studi hanno dimostrato che i teadenoli possono favorire la perdita di peso, combattere il diabete, combattere l’ossidazione, inibire la proliferazione delle cellule tumorali e sbiancare la pelle.

Il teadenol A può promuovere la secrezione di adiponectina. L'adiponectina è un peptide endogeno secreto dagli adipociti ed altamente specifico per il tessuto adiposo. È altamente correlato negativamente con il tessuto adiposo viscerale e ha proprietà antinfiammatorie e antiaterosclerotiche. Quindi il Teadenol A ha il potenziale per perdere peso.

Il teadenolo A inibisce anche l'espressione della proteina tirosina fosfatasi 1B (PTP1B), una classica tirosina fosfatasi non recettoriale nella famiglia delle proteine ​​tirosina fosfatasi, che svolge un importante ruolo negativo nella segnalazione dell'insulina ed è attualmente riconosciuta come bersaglio terapeutico per il diabete. Il teadenol A può regolare positivamente l'insulina inibendo l'espressione di PTP1B. Nel frattempo, TOMOTAKA et al. ha dimostrato che il Teadenol A è un ligando del recettore degli acidi grassi a catena lunga GPR120, che può legare e attivare direttamente GPR120 e promuovere la secrezione dell'ormone insulina GLP-1 nelle cellule endocrine intestinali STC-1. Il Glp-1 inibisce l'appetito e aumenta la secrezione di insulina, mostrando effetti antidiabetici. Pertanto, il Teadenol A ha un potenziale effetto antidiabetico.

I valori IC50 dell’attività di eliminazione del DPPH e dell’attività di eliminazione dei radicali dell’anione superossido del Teadenol A erano rispettivamente di 64,8 μg/ml e 3,335 mg/ml. I valori IC50 della capacità antiossidante totale e della capacità di fornitura di idrogeno erano rispettivamente di 17,6 U/ml e 12 U/ml. È stato inoltre dimostrato che l'estratto di tè contenente Teadenol B ha un'elevata attività antiproliferativa contro le cellule tumorali del colon HT-29 e inibisce le cellule tumorali del colon HT-29 aumentando i livelli di espressione di caspasi-3/7, caspasi-8 e Caspase -9, morte dei recettori e vie dell'apoptosi mitocondriale.

Inoltre, i teadenoli sono una classe di polifenoli che possono sbiancare la pelle inibendo l'attività dei melanociti e la sintesi della melanina.

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La sintesi dei Teadenoli

Come si può vedere dai dati di ricerca nella Tabella 1, i teadenoli nel tè a fermentazione microbica hanno un basso contenuto e un costo elevato di arricchimento e purificazione, il che è difficile da soddisfare le esigenze di ricerca approfondita e sviluppo applicativo. Pertanto, gli studiosi hanno condotto studi sulla sintesi di tali sostanze da due direzioni di biotrasformazione e sintesi chimica.

WULANDARI et al. Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) inoculato nella soluzione mista di EGCG e GCG sterilizzati. Dopo 2 settimane di coltura a 25 ℃, è stata utilizzata l'HPLC per analizzare la composizione del terreno di coltura. Sono stati rilevati Teadenol A e Teadenol B. Successivamente, Aspergillus oryzae A. Awamori (NRIB-2061) e Aspergillus oryzae A. Kawachii (IFO-4308) sono stati inoculati in una miscela di autoclave EGCG e GCG, rispettivamente, utilizzando lo stesso metodo. Teadenol A e Teadenol B sono stati rilevati in entrambi i terreni. Questi studi hanno dimostrato che la trasformazione microbica di EGCG e GCG può produrre Teadenol A e Teadenol B. SONG et al. utilizzato EGCG come materia prima e inoculato Aspergillus sp per studiare le condizioni ottimali per la produzione di Teadenol A e Teadenol B mediante coltura liquida e solida. I risultati hanno mostrato che il mezzo CZapEK-DOX modificato contenente il 5% di EGCG e l’1% di polvere di tè verde aveva la resa più alta. Si è scoperto che l'aggiunta di polvere di tè verde non ha influenzato direttamente la produzione di Teadenol A e Teadenol B, ma ha indotto principalmente un aumento della quantità di biosintasi coinvolta. Inoltre, YOSHIDA et al. sintetizzato Teadenol A e Teadenol B dal floroglucinolo. I passaggi chiave della sintesi sono stati la reazione catalitica asimmetrica α -amminossica delle aldeidi catalitiche organiche e la sostituzione allilica intramolecolare del fenolo catalizzato dal palladio.

▲ Microscopia elettronica del processo di fermentazione del tè

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Studio applicativo dei Teadenols

Grazie alla sua significativa attività biologica, i teadenoli sono stati utilizzati in settori farmaceutici, alimentari e mangimi, cosmetici, reagenti di rilevamento e altri campi.

Esistono prodotti correlati contenenti teadenoli in campo alimentare, come il tè dimagrante giapponese e i polifenoli del tè fermentato. Inoltre, Yanagida et al. ha confermato che gli estratti di tè contenenti Teadenol A e Teadenol B potrebbero essere applicati alla lavorazione di alimenti, condimenti, integratori sanitari, mangimi per animali e cosmetici. ITO et al. ha preparato un agente topico per la pelle contenente teadenoli con forte effetto sbiancante, inibizione dei radicali liberi ed effetto antirughe. Ha anche effetti curativi contro l'acne, idratante, potenziante la funzione barriera, inibendo l'infiammazione derivata dai raggi UV e antidecubito.

In Cina, i teadenoli sono chiamati tè fu. I ricercatori hanno condotto molti studi sugli estratti di tè o sulle formule composte contenenti tè Fu A e tè Fu B in termini di riduzione dei lipidi nel sangue, perdita di peso, zucchero nel sangue, ipertensione e ammorbidimento dei vasi sanguigni. Il tè fu A ad elevata purezza purificato e preparato da Zhao Ming et al. può essere utilizzato per la preparazione di farmaci antilipidici. He Zhihong et al. ha prodotto capsule, compresse o granuli di tè contenenti tè scuro anhua di Fu A e Fu B, gynostema pentaphylla, Rhizoma orientalis, ophiopogon e altri prodotti medicinali e di omologia alimentare, che hanno effetti evidenti e duraturi sulla perdita di peso e sulla riduzione dei lipidi per tutti i tipi di obesi persone. Tan Xiao 'ao ha preparato il tè fuzhuan con fuzhuan A e Fuzhuan B, che è facile da assorbire dal corpo umano e ha effetti evidenti sulla riduzione dell'iperlipidemia, dell'iperglicemia, dell'ipertensione e sull'ammorbidimento dei vasi sanguigni.

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"Lingua

I teadenoli sono derivati ​​della catechina a fissione dell'anello B presenti nel tè fermentato microbico, che possono essere ottenuti dalla trasformazione microbica dell'epigallocatechina gallato o dalla sintesi totale del floroglucinolo. Gli studi hanno dimostrato che i teadenoli sono contenuti in vari tè fermentati microbici. I prodotti includono tè fermentato Aspergillus Niger, tè fermentato Aspergillus oryzae, tè fermentato Aspergillus oryzae, tè fermentato Sachinella, Kippukucha (Giappone), Saryusoso (Giappone), Yamabukinadeshiko (Giappone), Suraribijin (Giappone), Kuroyamecha (Giappone), Gentok U- cha (Giappone), Awa-Bancha (Giappone), Goishi-cha (Giappone), tè Pu 'er, tè Liubao e tè Fu Brick, ma il contenuto di Teadenol nei vari tè è significativamente diverso. Il contenuto di Teadenol A e B variava rispettivamente dallo 0,01% al 6,98% e dallo 0,01% allo 0,54%. Allo stesso tempo, i tè oolong, bianco, verde e nero non contengono questi composti.

Per quanto riguarda la ricerca attuale, gli studi sui teadenoli sono ancora limitati e coinvolgono solo la fonte, il contenuto, la biosintesi e il percorso sintetico totale, e il suo meccanismo di azione, sviluppo e applicazione necessita ancora di molta ricerca. Con l’ulteriore ricerca, i composti Teadenols avranno un maggiore valore di sviluppo e ampie prospettive di applicazione.