Astratto
9,10-anthrachinone (AQ) è un contaminante con un potenziale rischio cancerogeno e si verifica nel tè in tutto il mondo. Il limite massimo dei residui (MRL) di AQ nel tè stabilito dall'Unione Europea (UE) è di 0,02 mg/kg. Le possibili fonti di AQ nella lavorazione del tè e le fasi principali del suo verificarsi sono state studiate sulla base di un metodo analitico AQ modificato e dell'analisi di massa di massa cromatografica di gascromatografia (GC-MS/MS). Rispetto all'elettricità come fonte di calore nella lavorazione del tè verde, AQ è aumentato di 4,3 a 23,9 volte nella lavorazione del tè con carbone come fonte di calore, di gran lunga superiore a 0,02 mg/kg, mentre il livello di AQ nell'ambiente ha triplicato. La stessa tendenza è stata osservata nella lavorazione del tè oolong sotto calore del carbone. I passaggi con contatto diretto tra foglie di tè e fumi, come la fissazione e l'essiccazione, sono considerati i passaggi principali della produzione di AQ nella lavorazione del tè. I livelli di AQ sono aumentati con l'aumento del tempo di contatto, suggerendo che alti livelli di inquinante AQ nel tè possono essere derivati ​​dai fumi causati da carbone e combustione. Quaranta campioni di diversi seminari con elettricità o carbone quando sono state analizzate le fonti di calore, variavano dal 50,0% −85,0% e 5,0% -35,0% per il rilevamento e superano i tassi di Aq. Inoltre, il contenuto massimo di AQ di 0,064 mg/kg è stato osservato nel prodotto del tè con carbone come fonte di calore, indicando che gli alti livelli di contaminazione AQ nei prodotti del tè sono probabilmente contribuiti dal carbone.
Parole chiave: 9,10-antraquinone, elaborazione del tè, carbone, fonte di contaminazione
INTRODUZIONE
Il tè prodotto dalle foglie dell'arbusto sempreverde Camellia sinensis (L.) O. Kuntze, è una delle bevande più famose a livello globale grazie al suo gusto rinfrescante e ai benefici per la salute. Nel 2020 a livello globale, la produzione di tè era aumentata a 5.972 milioni di tonnellate, che è stato un raddoppio negli ultimi 20 anni [1]. Sulla base di diversi modi di trasformazione, ci sono sei tipi principali di tè, tra cui tè verde, tè nero, tè scuro, tè oolong, tè bianco e tè giallo [2,3]. Per garantire la qualità e la sicurezza dei prodotti, è molto importante monitorare i livelli di inquinanti e definire l'origine.

Identificare le fonti di contaminanti, come residui di pesticidi, metalli pesanti e altri inquinanti come idrocarburi policiclici aromatici (IPA), è il passo principale per controllare l'inquinamento. La spruzzatura diretta di sostanze chimiche sintetiche nelle piantagioni di tè, nonché la deriva dell'aria causata dalle operazioni vicino ai giardini del tè, sono la principale fonte di residui di pesticidi nel tè [4]. I metalli pesanti possono accumularsi nel tè e portare a tossicità, che sono principalmente derivati ​​da terreno, fertilizzante e atmosfera [5−7]. Per quanto riguarda gli altri inquinamento che appare inaspettatamente nel tè, era abbastanza difficile identificare a causa delle complesse procedure della catena di tè, tra cui piantagioni, lavorazione, pacchetto, stoccaggio e trasporto. Gli IPA nel tè provenivano dalla deposizione di scarichi di veicoli e dalla combustione dei carburanti utilizzati durante la lavorazione delle foglie di tè, come legna da ardere e carbone [8-10].

Durante la combustione del carbone e delle legna da ardere, si formano inquinanti come gli ossidi di carbonio [11]. Di conseguenza, è suscettibile che i residui di questi inquinanti sopra menzionati si verifichino nei prodotti trasformati, come grano, stock affumicato e pesce di gatto, ad alta temperatura, rappresentando una minaccia per la salute umana [12,13]. Gli IPA causati dalla combustione sono derivati ​​dalla volatilizzazione degli IPA contenuti nei carburanti stessi, dalla decomposizione ad alta temperatura dei composti aromatici e dalla reazione composta tra i radicali liberi [14]. La temperatura della combustione, il tempo e il contenuto di ossigeno sono fattori importanti che influenzano la conversione degli IPA. Con l'aumento della temperatura, il contenuto di PAH prima è aumentato e poi diminuito e il valore di picco si è verificato a 800 ° C; Il contenuto di PAHS è diminuito bruscamente fino alla traccia con l'aumentare del tempo di combustione quando era al di sotto di un limite chiamato "tempo di confine", con l'aumento del contenuto di ossigeno nell'aria di combustione, le emissioni di PAH sono ridotte significativamente, ma l'ossidazione incompleta produrrebbe Opah e altri derivati ​​[15-17].

9,10-anthrachinone (AQ, CAS: 84-65-1, Fig. 1), un derivato contenente ossigeno di IPA [18], è costituito da tre cicli condensati. È stato elencato come possibile cancerogeno (gruppo 2B) dall'Agenzia internazionale per la ricerca sul cancro nel 2014 [19]. AQ può avvelenare al complesso di scissione di topoisomerasi II e inibire l'idrolisi dell'adenosina trifosfato (ATP) da parte del DNA topoisomerasi II, causando interruzioni del doppio filamento di DNA, il che significa che l'esposizione a lungo termine sotto l'ambiente contenente Aq e il contatto diretto con un alto livello di AQ possono portare a DNA, mutazione e aumentare il rischio di cancro []. Come effetti negativi sulla salute umana, il limite di residui massimo AQ (MRL) di 0,02 mg/kg è stato ambientato nel tè dall'Unione Europea. Secondo i nostri studi precedenti, i depositi di AQ sono stati suggeriti come fonte principale durante la piantagione di tè [21]. Inoltre, in base alle conseguenze sperimentali nella lavorazione del tè verde e nero indonesiano, è ovvio che il livello di AQ è cambiato in modo significativo e il fumo dalle apparecchiature di elaborazione è stato suggerito come uno dei motivi principali [22]. Tuttavia, l'origine accurata di AQ nella lavorazione del tè è rimasta sfuggente, sebbene siano state suggerite alcune ipotesi di percorso chimico AQ [23,24], indicando che è estremamente importante determinare i fattori cruciali che influenzano il livello di AQ nella lavorazione del tè.

Figura 1. La formula chimica di Aq.

Data la ricerca sulla formazione di AQ durante la combustione del carbone e la potenziale minaccia di carburanti nella lavorazione del tè, è stato condotto un esperimento comparativo per spiegare l'effetto della lavorazione delle fonti di calore su AQ in tè e aria, analisi quantitative sui cambiamenti del contenuto di AQ a diverse fasi di elaborazione, che è utile per confermare l'origine accurata, il modello di occasione e il grado di inquinamento da AQ.

Risultati
Convalida del metodo
Rispetto al nostro studio precedente [21], una procedura di estrazione liquido-liquido è stata combinata prima dell'iniezione a GC-MS/MS al fine di migliorare la sensibilità e mantenere dichiarazioni strumentali. In Fig 2b, il metodo migliorato ha mostrato un miglioramento significativo nella purificazione del campione, il solvente è diventato di colore più chiaro. In Fig 2A, uno spettro di scansione completo (50-350 m/z) ha illustrato che dopo la purificazione, la linea di base dello spettro MS si è ridotta ovviamente e il minor numero di picchi cromatografici erano disponibili, indicando che un gran numero di composti interferenti sono stati rimossi dopo l'estrazione del liquido-liquido.

Figura 2. (A) Spettro a scansione completa del campione prima e dopo la purificazione. (b) L'effetto di purificazione del metodo migliorato.
La convalida del metodo, tra cui linearità, recupero, limite di quantificazione (LOQ) e effetto matrice (ME), sono mostrati nella Tabella 1. È soddisfacente ottenere la linearità con il coefficiente di determinazione (R2) superiore a 0,998, che variava da 0,005 a 0,2 mg/kg nella matrice di tè e nella matrice di tè e nella matrice del tè.

Il recupero di AQ è stato valutato a tre concentrazioni di picco tra concentrazioni misurate e effettive nel tè secco (0,005, 0,02, 0,05 mg/kg), germogli di tè freschi (0,005, 0,01, 0,02 mg/kg) e campione d'aria (0,5, 1,5, 3 μg/m3). Il recupero di AQ nei tè variava dal 77,78% all'113,02% nel tè secco e dal 96,52% al 125,69% nei germogli di tè, con un numero di RSD inferiore al 15%. Il recupero di AQ nei campioni d'aria variava dal 78,47% al 117,06% con RSD% inferiore al 20%. La concentrazione di picco più basse è stata identificata come LOQ, che erano 0,005 mg/kg, 0,005 mg/kg e 0,5 μg/m³ nei germogli di tè, rispettivamente campioni di tè e aria secchi. Come elencato nella Tabella 1, la matrice del tè secco e le riprese del tè ha aumentato leggermente la risposta AQ, portando al ME del 109,0% e del 110,9%. Per quanto riguarda la matrice dei campioni d'aria, il ME era del 196,1%.

I livelli di AQ durante la lavorazione del tè verde
Con l'obiettivo di scoprire gli effetti di diverse fonti di calore sul tè e sull'ambiente di lavorazione, un lotto di foglie fresche è stato diviso in due gruppi specifici ed elaborate separatamente in due seminari di elaborazione nella stessa impresa. Un gruppo è stato fornito con elettricità e l'altro con carbone.

Come mostrato in Fig. 3, il livello AQ con elettricità poiché la fonte di calore variava da 0,008 a 0,013 mg/kg. Durante il processo di fissazione, la pergamena delle foglie di tè causata dalla lavorazione in una pentola con alta temperatura ha comportato un aumento del 9,5% di AQ. Quindi, il livello di AQ è rimasto durante il processo di rotolamento nonostante la perdita di succo, suggerendo che i processi fisici potrebbero non influire sul livello di AQ nella lavorazione del tè. Dopo le prime fasi di asciugatura, il livello di AQ è leggermente aumentato da 0,010 a 0,012 mg/kg, quindi ha continuato a salire a 0,013 mg/kg fino alla fine della riorganizzazione. I PF, che hanno mostrato in modo significativo la variazione in ciascun passaggio, erano 1,10, 1,03, 1,24, 1,08 in fissaggio, rotolamento, prima asciugatura e riorganizzazione, rispettivamente. I risultati della PFS hanno suggerito che l'elaborazione sotto energia elettrica ha avuto un leggero effetto sui livelli di AQ nel tè.

Figura 3. Il livello AQ durante la lavorazione del tè verde con elettricità e carbone come fonti di calore.
Nel caso del carbone come fonte di calore, il contenuto di AQ è aumentato bruscamente durante la lavorazione del tè, aumentando da 0,008 a 0,038 mg/kg. Il 338,9% AQ è stato aumentato nella procedura di fissazione, raggiungendo 0,037 mg/kg, che ha superato di gran lunga l'MRL di 0,02 mg/kg stabilito dall'Unione Europea. Durante la fase di rotolamento, il livello di AQ è ancora aumentato del 5,8% nonostante sia lontano dalla macchina di fissazione. Nella prima asciugatura e rimodellamento, il contenuto di AQ è aumentato leggermente o diminuito. Il PFS che utilizzava il carbone come fonte di calore in fissaggio, la prima asciugatura e la riorganizzazione erano rispettivamente di 4,39, 1,05, 0,93 e 1,05.

Per determinare ulteriormente la relazione tra la combustione del carbone e l'inquinamento da AQ, le questioni di particolato sospese (PMS) nell'aria nei seminari in entrambe le fonti di calore sono stati raccolti per la valutazione dell'aria, come mostrato in Fig. 4. Il livello AQ di PMS con carbone come fonte di calore era 2,98 μg/m3, che era oltre tre volte superiore a quello con elettricità 0.91 μg/m3.

Figura 4. I livelli di AQ nell'ambiente con elettricità e carbone come fonte di calore. * Indica differenze significative nei livelli di AQ nei campioni (p <0,05).

I livelli di AQ durante la lavorazione del tè oolong oolong, prodotto principalmente in Fujian e Taiwan, sono una sorta di tè parzialmente fermentato. Per determinare ulteriormente le fasi principali per aumentare il livello di AQ e gli effetti di diversi combustibili, lo stesso lotto di foglie fresche è stato trasformato in tè oolong con il carbone e l'ibrido di gas naturale-elettrico come fonti di calore, contemporaneamente. I livelli di AQ nella lavorazione del tè oolong utilizzando diverse sorgenti di calore sono mostrati in Fig. 5. Per la lavorazione del tè oolong con ibrido a gas naturale-elettrico, la tendenza del livello di AQ era stagnante inferiore a 0,005 mg/kg, che era simile a quella nel tè verde con elettricità.

Figura 5. Il livello AQ durante la lavorazione del tè oolong con miscela di gas elettrica naturale e carbone come fonte di calore.

Con il carbone come fonte di calore, i livelli di AQ nei primi due passaggi, appassendo e realizzando verdi, erano essenzialmente gli stessi della miscela di gas naturale-elettrica. Tuttavia, le procedure successive fino a quando la fissazione ha mostrato il divario allargato gradualmente, a quel punto il livello di AQ è salito da 0,004 a 0,023 mg/kg. Il livello nella fase di rotolamento impacchettata è diminuito a 0,018 mg/kg, il che può essere dovuto alla perdita di succo di tè che porta via alcuni contaminanti AQ. Dopo la fase di rotolamento, il livello nella fase di essiccazione è aumentato a 0,027 mg/kg. Nell'erogazione, a fare verde, fissazione, rotolamento e asciugatura imballati, il PFS era rispettivamente 2,81, 1,32, 5,66, 0,78 e 1,50.

Il verificarsi di AQ nei prodotti da tè con diverse sorgenti di calore

Per determinare gli effetti sul contenuto di AQ del tè con diverse sorgenti di calore, 40 campioni di tè dai seminari del tè usando elettricità o carbone come fonti di calore sono stati analizzati, come mostrato nella Tabella 2. Rispetto all'uso dell'elettricità come fonte di calore, il carbone aveva la maggior parte dei tassi di detective (85,0%) con il massimo di Aq aq di una massima. Il tasso del 35,0% è stato osservato in campioni di carbone. Più evidentemente, l'elettricità aveva rispettivamente i tassi investigativi più bassi e di eccedenza del 56,4% e del 7,7%, con il contenuto massimo di 0,020 mg/kg.

DISCUSSIONE

Sulla base del PFS durante l'elaborazione con i due tipi di fonti di calore, era chiaro che la fissazione era il passo principale che ha portato all'aumento dei livelli di AQ nella produzione di tè con carbone ed elaborazione sotto energia elettrica ha avuto un leggero effetto sul contenuto di AQ nel tè. Durante la lavorazione del tè verde, la combustione del carbone ha prodotto molti fumi nel processo di fissazione rispetto al processo di riscaldamento elettrico, indicando che forse i fumi erano la principale fonte di inquinanti AQ dal contatto con i germogli di tè all'istante nella lavorazione del tè, simile al processo di esposizione nei campioni di barbecue affumicati [25]. L'aumento leggermente del contenuto di AQ durante la fase di rotazione ha suggerito che i fumi causati dalla combustione del carbone non solo hanno influenzato il livello di AQ durante la fase di fissazione, ma anche nell'ambiente di elaborazione a causa della deposizione atmosferica. I carboni sono stati anche usati come fonte di calore nella prima asciugatura e rimodellamento, ma in questi due passaggi il contenuto di AQ aumentava leggermente o diminuiva leggermente. Ciò può essere spiegato dal fatto che l'essiccatore chiuso a vento a caldo ha tenuto il tè lontano dai fumi causati dalla combustione del carbone [26]. Al fine di determinare la fonte di inquinanti, sono stati analizzati i livelli di AQ nell'atmosfera, con conseguente divario significativo tra i due seminari. Il motivo principale di ciò è che il carbone utilizzato nelle fasi fissate, prima essiccazione e rimodellamento genererebbe AQ durante la combustione incompleta. Questi AQ sono stati quindi adsorbiti nelle piccole particelle di solidi dopo la combustione del carbone e si sono dispersi nell'aria, elevando i livelli di inquinamento da AQ nell'ambiente del seminario [15]. Nel tempo, a causa della grande superficie specifica e della capacità di adsorbimento del tè, questi particolati si sono quindi sistemati sulla superficie delle foglie di tè, con conseguente aumento di AQ in produzione. Pertanto, si pensava che la combustione del carbone fosse la via principale che porta all'eccessiva contaminazione di AQ nella lavorazione del tè, con i fumi che erano la fonte di inquinamento.

Per quanto riguarda la lavorazione del tè Oolong, AQ è stato aumentato in elaborazione con entrambe le fonti di calore, ma la differenza tra le due fonti di calore era significativa. I risultati hanno anche suggerito che il carbone come fonte di calore ha svolto un ruolo importante nell'aumento del livello di AQ e che la fissazione è stata considerata il passo principale per aumentare la contaminazione di AQ nella lavorazione del tè Oolong in base al PFS. Durante la lavorazione del tè oolong con ibrido elettrico a gas naturale come fonte di calore, la tendenza del livello di AQ era stagnante inferiore a 0,005 mg/kg, che era simile a quella nel tè verde con elettricità, suggerendo che l'energia pulita, come l'elettricità e il gas naturale, potevano ridurre il rischio di produrre contaminanti AQ dal processo.

Per quanto riguarda i test di campionamento, i risultati hanno mostrato che la situazione della contaminanti di AQ era peggiore quando si usa il carbone come fonte di calore piuttosto che l'elettricità, che potrebbe essere dovuta ai fumi dalla combustione del carbone che entrano in contatto con foglie di tè e persiste sul posto di lavoro. Tuttavia, sebbene fosse ovvio che l'elettricità fosse la fonte di calore più pulita durante la lavorazione del tè, c'era ancora un contaminante AQ nei prodotti da tè che utilizzavano l'elettricità come fonte di calore. La situazione sembra leggermente simile alle opere precedentemente pubblicate in cui è stata suggerita la reazione di 2- alchene con idrochinoni e benzochinoni come potenziale percorso chimico [23], ragioni per ciò sarà studiata nella ricerca futura.

Conclusioni

In questo lavoro, le possibili fonti di inquinamento AQ nel tè verde e oolong sono state confermate da esperimenti comparativi basati su metodi analitici GC-MS/MS migliorati. I nostri risultati hanno supportato direttamente che la principale fonte di inquinanti di alti livelli di AQ era causata dalla combustione, che non solo ha influenzato le fasi di elaborazione, ma ha anche influenzato gli ambienti dell'officina. A differenza delle fasi rotolanti e appassite, in cui le variazioni del livello di AQ erano poco appariscenti, le fasi con coinvolgimento diretto di carbone e legna da ardere, come la fissazione, sono il processo principale in cui la contaminazione di AQ è aumentata a causa della quantità di contatto tra tè e fumi durante queste fasi. Pertanto, i carburanti puliti come il gas naturale ed elettricità sono stati raccomandati come fonte di calore nella lavorazione del tè. Inoltre, i risultati sperimentali hanno anche mostrato che in assenza di fumi generati dalla combustione, c'erano ancora altri fattori che contribuiscono a tracciare AQ durante la lavorazione del tè, mentre piccole quantità di AQ sono state osservate anche nel seminario con carburanti puliti, che dovrebbero essere ulteriormente studiati nella ricerca futura.

Materiali e metodi

Reagenti, sostanze chimiche e materiali

Antrachinone Standard (99,0%) è stato acquistato dalla Dr. Ehrenstorfer GmbH Company (Augusta, Germania). Lo standard interno D8-anthrachinone (98,6%) è stato acquistato da isotopi C/D/N (Quebec, Canada). Solfato di sodio anidro (Na2SO4) e solfato di magnesio (MGSO4) (Shanghai, Cina). Florisil è stato fornito da Wenzhou Organic Chemical Company (Wenzhou, Cina). La carta in fibra di glass mircro-vetro (90 mm) è stata acquistata dalla Ahlstrom-Munksjö Company (Helsinki, Finlandia).

Preparazione del campione

I campioni di tè verde sono stati elaborati con fissazione, rotolamento, prima asciugatura e rimodellamento (utilizzando attrezzature chiuse), mentre i campioni di tè Oolong sono stati elaborati con appassimento, rendendo il verde (dondolo e in piedi foglie fresche alternativamente), fissazione, rotolamento confezionato e asciugatura. I campioni di ogni passaggio sono stati raccolti tre volte a 100 g dopo una miscelazione approfondita. Tutti i campioni sono stati conservati a -20 ° C per ulteriori analisi.

I campioni d'aria sono stati raccolti mediante carta in fibra di vetro (90 mm) utilizzando campionatori di volume medio (PTS-100, Qingdao Laoshan Electronic Instrument Company, Qingdao, Cina) [27], in esecuzione a 100 L/min per 4 ore.

Campioni fortificati sono stati arricchiti con AQ a 0,005 mg/kg, 0,010 mg/kg, 0,020 mg/kg per germogli di tè freschi, a 0,005 mg/kg, 0,020 mg/kg, 0,050 mg/kg per tè a secco e a 0,012 mg/kg (0,5 µg/m3 per il campione d'aria), 0,036 Air Smaple), 0,072 mg/kg (3,0 µg/m3 per il campione d'aria) per carta da filtro di vetro, rispettivamente. Dopo aver agitato accuratamente, tutti i campioni sono stati lasciati per 12 ore, seguiti da passaggi di estrazione e pulizia.

Il contenuto di umidità è stato ottenuto prelevando 20 g del campione dopo aver mescolato ogni passaggio, riscaldando a 105 ° C per 1 ora, quindi pesando e ripetendo tre volte e prendendo il valore medio e dividendolo per peso prima del riscaldamento.

Estrazione del campione e pulizia

Campione di tè: l'estrazione e la purificazione di AQ dai campioni di tè sono stati eseguiti in base al metodo pubblicato di Wang et al. con diversi adattamenti [21]. In breve, 1,5 g di campioni di tè sono stati prima miscelati con 30 μL di D8-AQ (2 mg/kg) e lasciati in piedi per 30 minuti, quindi ben miscelati con 1,5 ml di acqua deionizzata e lasciati stare per 30 minuti. 15 ml di acetone al 20% in n-esano sono stati aggiunti ai campioni di tè e sono stati sonicati per 15 minuti. Quindi i campioni sono stati vortici con 1,0 g MGSO4 per 30 s e centrifugati per 5 minuti, a 11.000 giri / min. Dopo essere stato spostato a 100 ml di boccette a forma di pera, 10 ml della fase organica superiore sono stati evaporati in quasi secchezza sotto vuoto a 37 ° C. 5 ml di acetone 2,5% in n-esano ha risvolto l'estratto in boccette a forma di pera per la purificazione. La colonna di vetro (10 cm × 0,8 cm) consisteva dalla parte inferiore alla parte superiore della lana di vetro e 2G Florisil, che era tra due strati di Na2SO4 da 2 cm. Quindi 5 ml di acetone del 2,5% in n-esano hanno previsto la colonna. Dopo il caricamento della soluzione ridisolved, AQ è stato eluito tre volte con 5 mL, 10 mL, 10 mL di acetone del 2,5% in n-esano. Gli eluati combinati sono stati trasferiti a boccette a forma di pera ed evaporati in quasi secchezza sotto vuoto a 37 ° C. Il residuo essiccato è stato quindi ricostituito con 1 mL di acetone al 2,5% in esano seguito da filtrazione attraverso un filtro a dimensioni dei pori da 0,22 µm. Quindi la soluzione ricostituita è stata miscelata con acetonitrile con un rapporto di volume di 1: 1. Seguendo la fase di agitazione, il subnatante è stato utilizzato per l'analisi GC-MS/MS.

Campione d'aria: metà della carta in fibra, gocciolata con 18 μL di D8-AQ (2 mg/kg), è stata immersa in 15 ml di acetone al 20% in n-esano, quindi sonicata per 15 minuti. La fase organica è stata separata mediante centrifugazione a 11.000 giri / min per 5 minuti e l'intero strato superiore è stato rimosso in un pallone a forma di pera. Tutte le fasi organiche sono state evaporate in quasi secchezza sotto vuoto a 37 ° C. 5 ml di acetone del 2,5% in esano hanno ridistinto gli estratti per la purificazione allo stesso modo dei campioni di tè.

Analisi GC-MS/MS

VARIAN 450 Gascromatograph dotato di Varian 300 Tandem Mass Detector (Varian, Walnut Creek, CA, USA) è stato utilizzato per eseguire l'analisi AQ con il software MS Workstation versione 6.9.3. Per la separazione cromatografica è stato usato VF-5ms colonna capillare Varian quattro (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm). Il gas di trasporto, elio (> 99,999%), è stato fissato ad una portata costante di 1,0 ml/min con gas di collisione di argon (> 99,999%). La temperatura del forno è iniziata da 80 ° C e mantenuta per 1 minuto; aumentato a 15 ° C/min a 240 ° C, quindi ha raggiunto 260 ° C a 20 ° C/min e mantenuto per 5 minuti. La temperatura della sorgente ionica era di 210 ° C, nonché la temperatura della linea di trasferimento di 280 ° C. Il volume di iniezione era di 1,0 μl. Le condizioni di MRM sono mostrate nella Tabella 3.

Agilent 8890 gascromatografo dotato di spettrometro di massa a tripla quadrupolo a tripla quadrupolo Agilent (Agilent, Stevens Creek, CA, USA) è stato utilizzato per analizzare l'effetto di purificazione con il software Masshunter versione 10.1. Per la separazione cromatografica è stata utilizzata la colonna GC HP-5ms Agilent HP-5ms (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm). Il gas portatore, elio (> 99,999%), è stato fissato ad una portata costante di 2,25 ml/min con gas di collisione di azoto (> 99,999%). La temperatura della sorgente di ione Ei è stata regolata a 280 ° C, la stessa della temperatura della linea di trasferimento. La temperatura del forno è iniziata da 80 ° C ed è stata mantenuta per 5 minuti; Sollevato da 15 ° C/min a 240 ° C, quindi ha raggiunto 280 ° C a 25 ° C/min e mantenuto per 5 minuti. Le condizioni di MRM sono mostrate nella Tabella 3.

Analisi statistica
Il contenuto di AQ nelle foglie fresche è stato corretto al contenuto di materia secca dividendo il contenuto di umidità al fine di confrontare e analizzare i livelli di AQ durante l'elaborazione.

I cambiamenti di AQ nei campioni di tè sono stati valutati con Microsoft Excel Software e IBM SPSS Statistics 20.

Il fattore di elaborazione è stato utilizzato per descrivere i cambiamenti in AQ durante la lavorazione del tè. PF = RL/RF, dove RF è il livello AQ prima della fase di elaborazione e RL è il livello AQ dopo la fase di elaborazione. PF indica una diminuzione (PF <1) o un aumento (PF> 1) in AQ Residuale durante una specifica fase di elaborazione.

ME indica una diminuzione (ME <1) o un aumento (ME> 1) in risposta agli strumenti analitici, che si basa sul rapporto tra pendii di calibrazione nella matrice e solvente come segue:

ME = (SlopeMatrix/Slopesolvent - 1) × 100%

Dove la slopematrix è la pendenza della curva di calibrazione nel solvente abbinato a matrice, Slopesolvent è la pendenza della curva di calibrazione nel solvente.

Riconoscimenti
Questo lavoro è stato supportato dal progetto scientifico e tecnologico nella provincia di Zhejiang (2015c12001) e National Science Foundation of China (42007354).
Conflitto di interesse
Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.
Diritti e autorizzazioni
Copyright: © 2022 degli autori. Licenziatario esclusivo Maximum Academic Press, Fayetteville, GA. Questo articolo è un articolo di accesso aperto distribuito su Creative Commons Attribution License (CC da 4.0), visitare https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.
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