Tee on üks maailma kolmest peamisest polüfenoolirikkast joogist, millel on antioksüdant, vähivastane, viirusevastane, hüpoglükeemiline, hüpolipideemiline ja muud bioloogilised toimed ning tervishoiufunktsioonid. Tee võib selle töötlemistehnoloogia ja fermentatsiooniastme järgi jagada fermenteerimata teeks, fermenteeritud teeks ja järelkääritatud teeks. Järelkääritatud tee viitab teele, mille fermentatsioonis osalevad mikroorganismid, nagu näiteks Pu 'er keedetud tee, Fu Brick tee, Hiinas toodetud Liubao tee ning Jaapanis toodetud Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin ja Kuroyamecha. Inimesed armastavad neid mikroobse kääritatud teesid nende tervisemõjude tõttu, nagu vererasva, veresuhkru ja kolesterooli alandamine.

Pärast mikroobset kääritamist muunduvad tees sisalduvad tee polüfenoolid ensüümide toimel ja tekib palju uue struktuuriga polüfenoole. Teadenol A ja Teadenol B on Aspergillus sp (PK-1, FARM AP-21280) fermenteeritud teest eraldatud polüfenooli derivaadid. Järgmises uuringus tuvastati see suurtes kogustes kääritatud tees. Teadenoolidel on kaks stereoisomeeri, cis-Teadenool A ja trans-Teadenool B. Molekulivalem C14H12O6, molekulmass 276,06, [MH]-275,0562, struktuurvalem on näidatud joonisel 1. Teadenoolidel on tsüklilised rühmad, mis on sarnased a-tsüklile ja C- flavaan-3-alkoholide ringstruktuurid ja on b-tsükli lõhustumine katehhiini derivaadid. Teadenol A ja Teadenol B saab biosünteesida vastavalt EGCG-st ja GCG-st.

Järgnevates uuringutes leiti, et Teadenolidel oli bioloogiline toime, nagu adiponektiini sekretsiooni soodustamine, valgu türosiinfosfataasi 1B (PTP1B) ekspressiooni pärssimine ja valgendamine, mis äratas paljude teadlaste tähelepanu. Adiponektiin on rasvkoele väga spetsiifiline polüpeptiid, mis võib oluliselt vähendada metaboolsete häirete esinemissagedust II tüüpi diabeedi korral. PTP1B on praegu tunnistatud diabeedi ja rasvumise terapeutiliseks sihtmärgiks, mis näitab, et Teadenolsil on potentsiaalne hüpoglükeemiline ja kehakaalu langetav toime.

Käesolevas töös vaadeldi Teadenoolide sisalduse tuvastamist, biosünteesi, totaalset sünteesi ja bioaktiivsust mikroobse fermenteeritud tees, et anda Teadenolide väljatöötamiseks ja kasutamiseks teaduslik alus ja teoreetiline alus.

▲ TA füüsiline pilt

01

Teadenoolide tuvastamine mikroobse fermenteeritud tees

Pärast seda, kui Teadenoolid saadi Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) fermenteeritud teest esimest korda, kasutati HPLC ja LC-MS/MS tehnikaid erinevate teeliikide Teadenoolide uurimiseks. Uuringud on näidanud, et Teadenoolid esinevad peamiselt mikroobse fermenteeritud tee koostises.

▲ TA, TB vedelikkromatogramm

▲ Mikroobse fermenteeritud tee ning TA ja TB massispektromeetria

Aspergillus oryzae SP.PK-1, FARM AP-21280, Aspergillus oryzae sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus awamori sp.SK-1, Aspergillus oryzae Sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus oryzae sp.Aspergill sp. , NBRS 4122), Eurotium sp. Ka-1, FARM AP-21291, Teadenoolide erinevad kontsentratsioonid tuvastati kääritatud tees Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin ja Kuroyamecha, Jaapanis müüdavas gentoku-chas ning keedetud tees Pu erh, Liubao tee ja Fu Brick Hiina tee.

Teadenoolide sisaldus erinevates teedes on erinev, mille põhjuseks arvatakse olevat erinevad töötlemis- ja fermentatsioonitingimused.

Edasised uuringud näitasid, et Teadenoolide sisaldus ilma mikroobse fermentatsiooniga töötlemata teelehtedes, nagu roheline tee, must tee, oolong tee ja valge tee, oli äärmiselt madal, põhimõtteliselt alla avastamispiiri. Teadenooli sisaldus erinevates teelehtedes on näidatud tabelis 1.

02

Teadenoolide bioaktiivsus

Uuringud on näidanud, et Teadenolid võivad soodustada kehakaalu langust, võidelda diabeediga, võidelda oksüdatsiooniga, pärssida vähirakkude paljunemist ja valgendada nahka.

Teadenol A võib soodustada adiponektiini sekretsiooni. Adiponektiin on endogeenne peptiid, mida eritavad adipotsüüdid ja mis on rasvkoe suhtes väga spetsiifiline. See on väga negatiivses korrelatsioonis vistseraalse rasvkoega ning sellel on põletikuvastased ja ateroskleroosivastased omadused. Seega on Teadenol A-l võimalik kaalust alla võtta.

Teadenol A inhibeerib ka valgu türosiinfosfataasi 1B (PTP1B) ekspressiooni, mis on valgu türosiinfosfataasi perekonda kuuluv klassikaline mitte-retseptori türosiinfosfataasi, millel on oluline negatiivne roll insuliini signaaliülekandes ja mida praegu peetakse diabeedi terapeutiliseks sihtmärgiks. Teadenool A võib insuliini positiivselt reguleerida, pärssides PTP1B ekspressiooni. Vahepeal TOMOTAKA jt. näitas, et Teadenol A on pika ahelaga rasvhapete retseptori GPR120 ligand, mis võib otseselt seonduda ja aktiveerida GPR120 ning soodustada insuliinihormooni GLP-1 sekretsiooni soole endokriinsetes STC-1 rakkudes. Glp-1 pärsib söögiisu ja suurendab insuliini sekretsiooni, näidates diabeedivastast toimet. Seetõttu on Teadenol A-l potentsiaalne diabeedivastane toime.

Teadenol A DPPH eemaldamise aktiivsuse ja superoksiidi anioonide radikaalide eemaldamise aktiivsuse IC50 väärtused olid vastavalt 64,8 μg/ml ja 3,335 mg/ml. Antioksüdandi kogumahu ja vesinikuvarustusvõime IC50 väärtused olid vastavalt 17,6 U/mL ja 12 U/mL. Samuti on näidatud, et Teadenol B-d sisaldaval teeekstraktil on kõrge proliferatsioonivastane toime HT-29 käärsoolevähi rakkude suhtes ja see inhibeerib HT-29 käärsoolevähi rakke, suurendades kaspaas-3/7, kaspaas-8 ja kaspaasi ekspressioonitaset. -9, retseptori surm ja mitokondriaalse apoptoosi teed.

Lisaks on Teadenols polüfenoolide klass, mis võib nahka valgendada, pärssides melanotsüütide aktiivsust ja melaniini sünteesi.

03

Teadenoolide süntees

Nagu nähtub tabelis 1 toodud uurimisandmetest, on Teadenols mikroobse fermentatsiooniga tees madala sisaldusega ning kõrge rikastamise ja puhastamise kuluga, mistõttu on raske rahuldada süvauuringute ja rakenduste arendamise vajadusi. Seetõttu on teadlased läbi viinud selliste ainete sünteesi uuringuid biotransformatsiooni ja keemilise sünteesi kahest suunast.

WULANDARI jt. inokuleeritud Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) steriliseeritud EGCG ja GCG segalahuses. Pärast 2-nädalast kultiveerimist 25 ℃ juures kasutati söötme koostise analüüsimiseks HPLC-d. Tuvastati Teadenol A ja Teadenol B. Hiljem inokuleeriti Aspergillus oryzae A. Awamori (NRIB-2061) ja Aspergillus oryzae A. Kawachii (IFO-4308) sama meetodit kasutades vastavalt autoklaavi EGCG ja GCG segusse. Teadenol A ja Teadenol B tuvastati mõlemas söötmes. Need uuringud on näidanud, et EGCG ja GCG mikroobne transformatsioon võib tekitada Teadenol A ja Teadenol B. SONG et al. kasutas toorainena EGCG-d ja inokuleeris Aspergillus sp, et uurida optimaalseid tingimusi Teadenol A ja Teadenol B tootmiseks vedela ja tahke kultuuriga. Tulemused näitasid, et modifitseeritud CZapEK-DOX sööde, mis sisaldas 5% EGCG-d ja 1% rohelise tee pulbrit, oli kõrgeima saagisega. Leiti, et rohelise tee pulbri lisamine Teadenol A ja Teadenol B tootmist otseselt ei mõjutanud, vaid põhjustas peamiselt kaasatud biosüntaasi koguse suurenemise. Lisaks YOSHIDA jt. sünteesiti floroglütsinoolist Teadenol A ja Teadenol B. Sünteesi põhietapid olid orgaaniliste katalüütiliste aldehüüdide asümmeetriline α-aminooksükatalüütiline reaktsioon ja pallaadiumiga katalüüsitud fenooli molekulisisene allüülasendus.

▲ Tee fermentatsiooniprotsessi elektronmikroskoopia

04

Teadenolsi rakendusuuring

Tänu oma märkimisväärsele bioloogilisele aktiivsusele on Teadenoole kasutatud farmaatsia-, toidu- ja sööda-, kosmeetika-, tuvastusreaktiivide ja muudes valdkondades.

Toiduvaldkonnas on seotud Teadenoole sisaldavaid tooteid, näiteks Jaapani salendav tee ja fermenteeritud tee polüfenoolid. Lisaks Yanagida et al. kinnitas, et Teadenol A-d ja Teadenol B-d sisaldavaid teeekstrakte saab kasutada toiduainete, maitseainete, terviselisandite, loomasööda ja kosmeetikatoodete töötlemisel. ITO et al. valmistas tugeva valgendava, vabade radikaalide pärssiva ja kortsudevastase toimega Teadenoli sisaldava naha paikse vahendi. Sellel on ka aknet raviv, niisutav, barjäärifunktsiooni tugevdav toime, UV-kiirguse põhjustatud põletike ja survehaavade pärssimine.

Hiinas nimetatakse Teadenoli fu teeks. Teadlased on läbi viinud palju uuringuid fu tee A ja Fu tee B sisaldavate teeekstraktide või liitvalemite kohta, mis puudutavad vere lipiidide sisalduse langetamist, kaalulangust, veresuhkrut, hüpertensiooni ja veresoonte pehmendamist. Kõrge puhtusastmega fu tee A on puhastatud ja valmistatud Zhao Ming et al. saab kasutada lipiidivastaste ravimite valmistamiseks. Ta Zhihong et al. valmistatud teekapslid, tabletid või graanulid, mis sisaldavad anhua tumedat teed Fu A ja Fu B, gynostema pentaphylla, Rhizoma orientalis, ophiopogon ja muid meditsiinilisi ja toiduga homoloogiatooteid, millel on ilmne ja püsiv mõju kehakaalu langusele ja lipiidide vähendamisele igasuguste rasvunud inimeste puhul inimesed. Tan Xiao 'ao valmistas fuzhuani teed fuzhuan A ja Fuzhuan B-ga, mis on inimkehas kergesti omastatav ja millel on ilmne mõju hüperlipideemia, hüperglükeemia, hüpertensiooni vähendamisele ja veresoonte pehmendamisele.

05

"Keel

Teadenoolid on mikroobse fermenteeritud tees leiduvad b-ringi lõhustumisega katehhiini derivaadid, mida võib saada epigallokatehhiingallaadi mikroobse transformatsiooni või floroglütsinooli täieliku sünteesi tulemusena. Uuringud on näidanud, et Teadenoolid sisalduvad erinevates mikroobse fermentatsiooniga teedes. Toodete hulka kuuluvad Aspergillus Niger fermenteeritud tee, Aspergillus oryzae fermenteeritud tee, Aspergillus oryzae fermenteeritud tee, Sachinella fermenteeritud tee, Kippukucha (Jaapan), Saryusoso (Jaapan), Yamabukinadeshiko (Jaapan), Suraribijin (Jaapan), Kuroyamecha (Jaapan), Gentok U- cha (Jaapan), Awa-Bancha (Jaapan), Goishi-cha (Jaapan), Pu 'er tee, Liubao tee ja Fu Brick tee, kuid Teadenolsi sisaldus erinevates teedes on oluliselt erinev. Teadenol A ja B sisaldus oli vastavalt 0,01–6,98% ja 0,01–0,54%. Samas ei sisalda neid ühendeid oolong, valge, roheline ja must tee.

Mis puudutab praegusi uuringuid, siis Teadenolsi käsitlevad uuringud on endiselt piiratud, hõlmates ainult allikat, sisu, biosünteesi ja kogu sünteesirada ning selle toimemehhanism ning arendus ja rakendus vajavad veel palju uurimistööd. Edasise uurimistööga on Teadenolsi ühenditel suurem arendusväärtus ja laialdased kasutusväljavaated.