Čaj je jedan od tri najveća svjetska pića, bogat polifenolima, s antioksidativnim, antikancerogenim, antivirusnim, hipoglikemijskim, hipolipidemijskim i drugim biološkim djelovanjem i zdravstvenim funkcijama. Čaj se prema tehnologiji prerade i stepenu fermentacije može podijeliti na nefermentirani čaj, fermentirani i postfermentirani čaj. Poslije fermentirani čaj odnosi se na čaj s mikrobiološkim učešćem u fermentaciji, kao što su Pu'er kuhani čaj, Fu Brick čaj, Liubao čaj proizveden u Kini, i Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin i Kuroyamecha proizveden u Japanu. Ove mikrobno fermentisane čajeve ljudi vole zbog njihovih zdravstvenih efekata kao što su snižavanje masti u krvi, šećera u krvi i holesterola.

Nakon mikrobne fermentacije, polifenoli čaja u čaju se transformišu enzimima i nastaju mnogi polifenoli nove strukture. Teadenol A i Teadenol B su derivati ​​polifenola izolovani iz fermentisanog čaja sa Aspergillus sp (PK-1, FARM AP-21280). U kasnijoj studiji otkriven je u velikim količinama fermentisanog čaja. Teadenoli imaju dva stereoizomera, cis-Teadenol A i trans-Teadenol B. Molekularna formula C14H12O6, molekulske težine 276,06, [MH]-275,0562, strukturna formula je prikazana na slici 1. Teadenoli imaju ciklične grupe i slične su C-a-prstenastim grupama. prstenaste strukture flavan 3-alkohola i derivati ​​su katehina fisije b-prstena. Teadenol A i Teadenol B se mogu biosintetizirati iz EGCG i GCG respektivno.

U kasnijim studijama, otkriveno je da Teadenoli imaju biološke aktivnosti kao što su promicanje lučenja adiponektina, inhibiranje ekspresije proteina tirozin fosfataze 1B (PTP1B) i izbjeljivanje, što je privuklo pažnju mnogih istraživača. Adiponektin je visoko specifičan polipeptid za masno tkivo, koji može značajno smanjiti učestalost metaboličkih poremećaja kod dijabetesa tipa II. PTP1B je trenutno prepoznat kao terapeutska meta za dijabetes i gojaznost, što ukazuje da Teadenoli imaju potencijalne hipoglikemijske efekte i gubitak težine.

U ovom radu je dat pregled detekcije sadržaja, biosinteze, ukupne sinteze i bioaktivnosti Teadenola u mikrobno fermentisanom čaju, kako bi se pružila naučna osnova i teorijska referenca za razvoj i korišćenje Teadenola.

▲ TA fizička slika

01

Detekcija teadenola u mikrobno fermentiranom čaju

Nakon što su Teadenoli prvi put dobijeni iz Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) fermentisanog čaja, HPLC i LC-MS/MS tehnike su korištene za proučavanje Teadenola u različitim vrstama čaja. Istraživanja su pokazala da teadenoli uglavnom postoje u mikrobno fermentiranom čaju.

▲ TA, TB tečni hromatogram

▲ Masena spektrometrija mikrobno fermentisanog čaja i TA i TB

Aspergillus oryzae SP.PK-1, FARM AP-21280, Aspergillus oryzae sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus awamori sp.SK-1, Aspergillus oryzae Sp.AO-1, ​​NBRS 4214, Aspergillus. , NBRS 4122), Eurotium sp. Ka-1, FARM AP-21291, Različite koncentracije teadenola otkrivene su u fermentisanom čaju Kippukucha, Saryusoso, Yamabukinadeshiko, Suraribijin i Kuroyamecha, gentoku-cha koji se prodaje u Japanu, te u kuhanom čaju Pu erh, Liubao tea kineski čaj.

Sadržaj Teadenola u različitim čajevima je različit, što se pretpostavlja da je uzrokovano različitim uvjetima obrade i fermentacije.

Dalja istraživanja su pokazala da je sadržaj teadenola u listovima čaja bez mikrobne fermentacije, kao što su zeleni čaj, crni čaj, oolong čaj i bijeli čaj, bio izuzetno nizak, u osnovi ispod granice detekcije. Sadržaj teadenola u raznim listovima čaja prikazan je u tabeli 1.

02

Bioaktivnost Teadenola

Istraživanja su pokazala da Teadenoli mogu potaknuti gubitak težine, boriti se protiv dijabetesa, boriti se protiv oksidacije, inhibirati proliferaciju stanica raka i izbjeljivati ​​kožu.

Teadenol A može podstaći lučenje adiponektina. Adiponektin je endogeni peptid koji luče adipociti i vrlo je specifičan za masno tkivo. U velikoj je negativnoj korelaciji s visceralnim masnim tkivom i ima protuupalna i antiaterosklerotična svojstva. Dakle, Teadenol A ima potencijal da smrša.

Teadenol A također inhibira ekspresiju protein tirozin fosfataze 1B (PTP1B), klasične nereceptorske tirozin fosfataze u porodici protein tirozin fosfataze, koja igra važnu negativnu ulogu u signaliziranju inzulina i trenutno je prepoznata kao A terapeutska meta za dijabetes. Teadenol A može pozitivno regulisati inzulin inhibiranjem ekspresije PTP1B. U međuvremenu, TOMOTAKA i dr. pokazalo je da je Teadenol A A ligand dugolančanog receptora masnih kiselina GPR120, koji može direktno vezati i aktivirati GPR120 i promovirati lučenje hormona inzulina GLP-1 u crijevnim endokrinim STC-1 stanicama. Glp-1 inhibira apetit i povećava lučenje inzulina, pokazujući antidijabetičko djelovanje. Stoga, Teadenol A ima potencijalno antidijabetičko dejstvo.

Vrijednosti IC50 aktivnosti čišćenja DPPH i aktivnosti uklanjanja superoksidnih anjonskih radikala Teadenola A bile su 64,8 μg/mL i 3,335 mg/mL, respektivno. Vrijednosti IC50 ukupnog antioksidativnog kapaciteta i kapaciteta snabdijevanja vodonikom bile su 17,6 U/mL i 12 U/mL, respektivno. Također se pokazalo da ekstrakt čaja koji sadrži Teadenol B ima visoku antiproliferirajuću aktivnost protiv HT-29 ćelija raka debelog crijeva i inhibira HT-29 stanice raka debelog crijeva povećavajući nivoe ekspresije kaspaze-3/7, kaspaze-8 i kaspaze. -9, smrt receptora i putevi mitohondrijalne apoptoze.

Osim toga, Teadenoli su klasa polifenola koji mogu izbjeliti kožu inhibirajući aktivnost melanocita i sintezu melanina.

03

Sinteza Teadenola

Kao što se može vidjeti iz podataka istraživanja u Tabeli 1, Teadenoli u čaju od mikrobne fermentacije imaju nizak sadržaj i visoku cijenu obogaćivanja i prečišćavanja, što je teško zadovoljiti potrebe dubinskog istraživanja i razvoja primjene. Stoga su naučnici sproveli studije o sintezi takvih supstanci iz dva smjera biotransformacije i kemijske sinteze.

WULANDARI et al. inokulisan Aspergillus SP (PK-1, FARM AP-21280) u mešanom rastvoru sterilisanog EGCG i GCG. Posle 2 nedelje kulture na 25 ℃, HPLC je korišćen za analizu sastava medijuma za kulturu. Teadenol A i Teadenol B su otkriveni. Kasnije su Aspergillus oryzae A. Awamori (NRIB-2061) i Aspergillus oryzae A. Kawachii (IFO-4308) inokulirane u mješavinu autoklavnog EGCG i GCG, respektivno, koristeći istu metodu. Teadenol A i Teadenol B su otkriveni u oba medijuma. Ove studije su pokazale da mikrobna transformacija EGCG i GCG može proizvesti Teadenol A i Teadenol B. SONG et al. koristio je EGCG kao sirovinu i inokulirao Aspergillus sp za proučavanje optimalnih uslova za proizvodnju Teadenola A i Teadenola B tečnom i čvrstom kulturom. Rezultati su pokazali da je najveći prinos imao modifikovani medij CZapEK-DOX koji sadrži 5% EGCG i 1% praha zelenog čaja. Utvrđeno je da dodatak zelenog čaja u prahu nije direktno utjecao na proizvodnju Teadenola A i Teadenola B, već je uglavnom inducirao povećanje količine uključene biosintaze. Pored toga, YOSHIDA et al. sintetizirao Teadenol A i Teadenol B iz floroglucinola. Ključni koraci sinteze bili su asimetrična α-aminoksi katalitička reakcija organskih katalitičkih aldehida i intramolekularna alilna supstitucija fenola kataliziranog paladijem.

▲ Elektronska mikroskopija procesa fermentacije čaja

04

Studija primjene Teadenola

Zbog svoje značajne biološke aktivnosti, Teadenoli se koriste u farmaceutskoj, prehrambenoj i stočnoj industriji, kozmetici, reagensima za detekciju i drugim poljima.

Postoje srodni proizvodi koji sadrže teadenole u prehrambenoj industriji, kao što su japanski čaj za mršavljenje i polifenoli fermentisanog čaja. Pored toga, Yanagida et al. potvrdio je da se ekstrakti čaja koji sadrže Teadenol A i Teadenol B mogu primijeniti u preradi hrane, začina, zdravstvenih dodataka, stočne hrane i kozmetike. ITO et al. pripremio sredstvo za lokalnu primjenu kože koje sadrži Teadenole sa snažnim efektom izbjeljivanja, inhibicijom slobodnih radikala i efektom protiv bora. Također ima efekte liječenja akni, hidratizira, poboljšava funkciju barijere, inhibira upalu uzrokovanu UV zračenjem i čireve protiv pritiska.

U Kini se Teadenoli nazivaju fu čajem. Istraživači su sproveli mnogo studija o ekstraktima čaja ili složenim formulama koje sadrže fu čaj A i Fu čaj B u smislu snižavanja lipida u krvi, gubitka težine, šećera u krvi, hipertenzije i omekšavanja krvnih sudova. Fu čaj visoke čistoće A pročišćen i pripremljen od strane Zhao Ming et al. može se koristiti za pripremu antilipidnih lijekova. He Zhihong et al. napravljene čajne kapsule, tablete ili granule koje sadrže anhua tamni čaj od Fu A i Fu B, gynostema pentaphylla, Rhizoma orientalis, ophiopogon i druge medicinske i prehrambene homološke proizvode, koji imaju očite i trajne učinke na gubitak težine i smanjenje lipida kod svih vrsta pretilih ljudi. Tan Xiao 'ao je pripremio fuzhuan čaj sa fuzhuan A i Fuzhuan B, koji se lako apsorbira u ljudskom tijelu i ima očigledan učinak na smanjenje hiperlipidemije, hiperglikemije, hipertenzije i omekšavanja krvnih sudova.

05

“Jezik

Teadenoli su derivati ​​katehina fisije b-prstena koji postoje u mikrobno fermentiranom čaju, a koji se mogu dobiti mikrobnom transformacijom epigalokatehin galata ili iz ukupne sinteze floroglucinola. Istraživanja su pokazala da se Teadenoli nalaze u raznim mikrobno fermentiranim čajevima. Proizvodi uključuju Aspergillus Niger fermentirani čaj, Aspergillus oryzae fermentirani čaj, Aspergillus oryzae fermentirani čaj, Sachinella fermentirani čaj, Kippukucha (Japan), Saryusoso (Japan), Yamabukinadeshiko (Japan), Suraribijiyame Gencha (Japan), Kuraribijiyame (Japan). cha (Japan), Awa-Bancha (Japan), Goishi-cha (Japan), Pu'er čaj, Liubao čaj i Fu Brick čaj, ali sadržaj Teadenola u različitim čajevima se značajno razlikuje. Sadržaj Teadenola A i B kretao se od 0,01% do 6,98%, odnosno 0,01% do 0,54%. Istovremeno, oolong, bijeli, zeleni i crni čajevi ne sadrže ove spojeve.

Što se tiče trenutnih istraživanja, studije o Teadenolima su još uvijek ograničene, uključuju samo izvor, sadržaj, biosintezu i ukupni sintetički put, a njihov mehanizam djelovanja i razvoja i primjene još uvijek zahtijeva mnogo istraživanja. Uz daljnja istraživanja, Teadenol jedinjenja će imati veću razvojnu vrijednost i široku perspektivu primjene.